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Methods and Instruments

LC-MS und GC-MS-Kopplung zur Detektion, Strukturaufklärung und Quantifizierung von Metaboliten

I. LC-MS

1. LC-ESI-QqQ-Massenspektrometrie (Agilent 6460)

QqQ_22

  • Quantifizierung von Metaboliten
  • Systematische Suche auf strukturhomologe Verbindungen
  • Aufklärung von Metabolismuswegen
  • Detektion von Minormetaboliten in komplexer Matrix
  • Semiquantitative Bestimmung von Substanzklassen
  • Überprüfung von Markierungsexperimenten
  • Fluxanalytik
 
 

 

2. LC-ESI-QqTOF-Massenspektrometrie (Agilent 96520A)

QqTOF_22

  • Metabolic Profiling: Datenbankrecherche und Datenbanksuchevon Metaboliten mit einer exakten Masse (Metlin-Datenbank)
  • Strukturanalytik von unbekannten Verbindungen
  • Erstellung von metabolischen Pathways
  • Identifizierung von Modifikationen
 
   

3. LC-ESI/APCI-Ionenmobilitäts-Massenspektrometrie (Waters Synapt HDMS)

Waters Synapt Ionenmobilitäts MS

  • Quantifizierung von Metaboliten
  • Systematische Suche auf strukturhomologe Verbindungen
  • Aufklärung von Metabolismuswegen
  • Detektion von Minormetaboliten in komplexer Matrix
  • Semiquantitative Bestimmung von Substanzklassen
  • Überprüfung von Markierungsexperimenten
  • Fluxanalytik

 

 

4. LC-ESI-Orbitrap-Massenspektrometrie (Thermo Scientific LTQ Orbitrap XL)

Orbi_22

  • Quantifizierung von Metaboliten
  • Systematische Suche auf strukturhomologe Verbindungen
  • Aufklärung von Metabolismuswegen
  • Detektion von Minormetaboliten in komplexer Matrix
  • Semiquantitative Bestimmung von Substanzklassen
  • Überprüfung von Markierungsexperimenten
  • Fluxanalytik

 

 
   

5. nanoLC-ESI-Orbitrap-Massenspektrometrie (Thermo Scientific LTQ Orbitrap XL)

 Orbi2_22

  • Quantifizierung von Metaboliten
  • Systematische Suche auf strukturhomologe Verbindungen
  • Aufklärung von Metabolismuswegen
  • Detektion von Minormetaboliten in komplexer Matrix
  • Semiquantitative Bestimmung von Substanzklassen
  • Überprüfung von Markierungsexperimenten
  • Fluxanalytik

 

 
   

6. LC-ESI-QqTOF-Massenspektrometrie (Bruker Impact HD)

Impact_22

  • Quantifizierung von Metaboliten
  • Systematische Suche auf strukturhomologe Verbindungen
  • Aufklärung von Metabolismuswegen
  • Detektion von Minormetaboliten in komplexer Matrix
  • Semiquantitative Bestimmung von Substanzklassen
  • Überprüfung von Markierungsexperimenten
  • Fluxanalytik
 
   

7. LC-ESI-Ionenfalle-Massenspektrometrie (Agilent 6340)

Iontrap_22

  • Quantifizierung von Metaboliten
  • Systematische Suche auf strukturhomologe Verbindungen
  • Aufklärung von Metabolismuswegen
  • Detektion von Minormetaboliten in komplexer Matrix
  • Semiquantitative Bestimmung von Substanzklassen
  • Überprüfung von Markierungsexperimenten
  • Fluxanalytik
 
   

 

 

II. GC-MS

 As a routine method we are profiling relative concentration changes in primary metabolites (sugars, sugar-alcohols, amino acids, organic acids and phosphorylated compounds). The mainly polar metabolites are extracted from the tissue, derivatised and the derivates are quantified and identified with an Agilent GC-Quadrupole-MS System, which can operate in EI and CI mode.
Several more targeted methods for analysing particular (also non-polar) compounds are developed in cooperation with the various users.

 

1. GC-EI/CI-Massenspektrometrie (Agilent 7890A/5975C)

gc_system

  • Quantifizierung von Metaboliten
  • Systematische Suche auf strukturhomologe Verbindungen
  • Aufklärung von Metabolismuswegen
  • Detektion von Minormetaboliten in komplexer Matrix
  • Semiquantitative Bestimmung von Substanzklassen
  • Überprüfung von Markierungsexperimenten
  • Fluxanalytik
 
   

 

 

GC-MS chromatogram

Fig.1: Example Chromatogram for a GC-MS primary metabolite profiling in Physcomitrella patens

 

 

 

 

 

fig2

Fig.2: Example for a cluster analysis for the relative changes of metabolite concentrations in Ricinus communis under anoxia.

 

III. Kooperationen

 

1. GC-EI-Massenspektrometrie (Thermo Scientific ISQ LT) in Kooperation mit dem Institut für Organische Chemie, Uni Freiburg

GC2_22

  • Quantifizierung von Metaboliten
  • Systematische Suche auf strukturhomologe Verbindungen
  • Aufklärung von Metabolismuswegen
  • Detektion von Minormetaboliten in komplexer Matrix
  • Semiquantitative Bestimmung von Substanzklassen
  • Überprüfung von Markierungsexperimenten
  • Fluxanalytik